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PCR儀設置指南
日期:2025-04-01 18:13
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摘要:
PCR(聚合酶鏈式反應)是利用DNA在體外攝氏95°高溫時變性會變成單鏈,低溫(經常是60°C左右)時引物與單鏈按堿基互補配對的原則結合,再調溫度至DNA聚合酶適反應溫度(72°C左右),DNA聚合酶沿著磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互補鏈。PCR儀實際就是一個溫控設備,能在95℃,55℃,72℃之間很好地進行溫度控制。應用PCR儀設置指南如下:
1、按 PCR 儀正面左下角電源開關,啟動 PCR 儀。
2、放 PCR 離心管,先把頂蓋向上扳,再往前推,露出放樣孔,PCR 管放入前應加好反應體系各組分,再放入 PCR 離心管。...
PCR(聚合酶鏈式反應)是利用DNA在體外攝氏95°高溫時變性會變成單鏈,低溫(經常是60°C左右)時引物與單鏈按堿基互補配對的原則結合,再調溫度至DNA聚合酶適反應溫度(72°C左右),DNA聚合酶沿著磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互補鏈。PCR儀實際就是一個溫控設備,能在95℃,55℃,72℃之間很好地進行溫度控制。應用PCR儀設置指南如下:
1、按 PCR 儀正面左下角電源開關,啟動 PCR 儀。
2、放 PCR 離心管,先把頂蓋向上扳,再往前推,露出放樣孔,PCR 管放入前應加好反應體系各組分,再放入 PCR 離心管。
3、反向重復第2步驟將頂蓋板向后拉,蓋好頂蓋。
4、按 F2“Create”新建一個擴增的 PCR 程序。
5、按控制臺面右方上下左右方向鍵,可隨意移動編輯位置,輸入需要的溫度、時間、循環數等。
6、據 PCR 離心管中加入的反應體積總量,在“Reaction volume”后輸入相應數值,有 Std“1~100ul”和 9600“1~50ul”兩檔可供選擇。
7、按 F1“Start”啟動
8、按“INFO”對應鍵查看 PCR 結束鍵。
9、擴增完成后按臺面左方“Stop”鍵退出。
10、按“Hist”,可查看上次擴增的歷史記錄。
11、完全退出后,按臺面左下方電源開關,拔出插銷,切斷電源。